Enzimi di restrizione e sequenze palindromiche?

Quali enzimi sono in grado di tagliare il DNA?

Le desossiribonucleasi II (sito-specifiche) (solitamente note con il nome di enzimi di restrizione) sono una classe di enzimi, appartenente alla classe delle idrolasi, che catalizzano il taglio endonucleolitico del DNA per dare frammenti specifici a doppia elica con fosfati terminali al 5'.

Come si proteggono i batteri?

I batteri possono difendersi contro le infezioni causati da batteriofagi utilizzando un sistema immunitario adattivo chiamato CRISPR-Cas. Questo sistema immunitario è stato scoperto solo nell'ultimo decennio, ed è presente in circa la metà delle specie batteriche ad oggi conosciute.

Cosa si intende per sito di restrizione?

Un sito di restrizione viene definito come una particolare sequenza di DNA (da 4 a decine di paia di basi in lunghezza) riconosciuta da un enzima di restrizione o endonucleasi come il punto in cui tagliare la molecola di DNA. Questi siti sono in genere sequenze palindrome e con una sequenza ben precisa.

Cosa riconoscono gli enzimi di restrizione?

Gli enzimi di restrizione riconoscono una sequenza palindroma di DNA, come quella di EcoRI, GAATTC, formata da basi simmetricamente complementari. La sequenza GAATTC è detta palindroma perchè può essere letta da sinistra a destra sulla catena superiore e da destra a sinistra su quella inferiore.

Cosa sono i frammenti di restrizione?

In biologia molecolare, la sigla RFLP (dall'inglese Restriction Fragment Length Polymorphism, polimorfismo da lunghezza dei frammenti di restrizione) viene utilizzata per indicare due concetti distinti: una caratteristica delle molecole del DNA che consente di distinguerle l'una dall'altra, grazie alle differenze nelle ...

Che cosa sono le estremità coesive?

In questo caso, i frammenti di restrizione terminano con due estremità a filamento singolo. Tali estremità contengono una sequenza di basi capace di legarsi a un'altra per complementarietà, perciò sono definite estremità coesive (▶figura 4).

Quali sono i principali enzimi digestivi?

Che cosa sono i vettori Plasmidici?

Vettori plasmidici

I plasmidi sono elementi genetici di DNA, circolari ed extracromosomici, che si replicano in maniera autonoma rispetto al cromosoma batterico. ... In breve il clonaggio mediante vettore plasmidico consiste nel trattare sia il plasmide che il DNA da clonare mediante uno stesso enzima di restrizione.

Quanti tipi di Endonucleasi esistono?

Esistono tre tipi di endonucleasi di restrizione, delle quali quelle di tipo I e di tipo III effettuano tagli non prevedibili e controllabili in sequenze a valle o adiacenti a quella di riconoscimento. Esse sono, pertanto, di poca utilità nelle tecniche di manipolazione del DNA.

A cosa serve elettroforesi su gel?

L'elettroforesi su gel di agarosio è una tecnica classicamente utilizzata per analizzare e separare acidi nucleici. Questa tecnica sfrutta le cariche presenti nelle molecole di DNA o RNA (caricate negativamente) per farle migrare, in un campo elettrico, attraverso un gel di agarosio.

Dove sono stati scoperti gli enzimi di restrizione?

Questi enzimi sono stati scoperti nei batteri, dove svolgono un'azione distruttiva nei confronti di eventuale DNA estraneo. ... Il DNA del batterio è modificato in modo da non essere tagliato dagli enzimi.

Chi produce gli enzimi di restrizione?

Molti batteri producono enzimi di restrizione che tagliano il DNA a livello di specifiche sequenze di nucleotidi. In natura, gli enzimi di restrizione difendono i batteri dall'attacco dei virus, tagliando il DNA del virus stesso.

Chi ha scoperto gli enzimi?

Il primo modello a essere stato messo a punto per spiegare la specificità degli enzimi è quello suggerito da Hermann Emil Fischer nel 1894, secondo il quale l'enzima e il substrato possiedono una forma esattamente complementare che ne permette un incastro perfetto. Tale modello è spesso definito come chiave-serratura.

Cosa serve per ottenere il Dna ricombinante?

Il DNA ricombinante viene ottenuto attraverso la tecnica del clonaggio; tale tecnica consiste nell'inserire un frammento di DNA in un vettore (formando il DNA ricombinante) e introdurre questo prodotto in una cellula ospite.

A cosa serve la PCR?

La PCR è una tecnica di biologia molecolare per replicare ripetutamente (amplificare), in modo estremamente selettivo, un tratto definito di DNA del quale si conoscano le sequenze nucleotidiche iniziali e terminali, partendo da una soluzione di DNA (nucleare, organellare, plasmidico, virale ecc.)

A cosa serve la metilazione del DNA?

Nei batteri, la metilazione del DNA, che può interessare sia la citosina che l'adenina, è utilizzata per distinguere un DNA estraneo dal proprio costituendo, di conseguenza, un sistema di difesa contro l'invasione di DNA estraneo.

Quali sono le malattie provocate dai batteri?

Neisseria meningitidis - meningite. Staphylococcus aureus - foruncoli, ascessi, cellulite, infezioni della ferita, sindrome da shock tossico, polmonite e intossicazione alimentare. Batteri streptococchi - polmonite, meningite, infezioni dell'orecchio e mal di gola.

Dove proliferano i batteri?

I batteri sono presenti in ogni ambiente, anche negli ambienti più estremi, dove nessuna altra forma di vita potrebbe sopravvivere. Si possono ritrovare nell'aria, nell'acqua, nel suolo, sui fondali oceanici, nei deserti, all'interno delle rocce, nel terreno ghiacciato del permafrost come pure nel nostro corpo.

Dove riescono a vivere i batteri?

Anche se non li possiamo vedere a occhio nudo, i batteri sono ovunque, nel nostro corpo e in tutto l'ambiente che ci circonda; alcuni di essi vivono addirittura negli ambienti più inospitali, come i fondali oceaneci o i ghiacciai.

A cosa serve un enzima?

Gli enzimi sono sostanze di natura proteica prodotte dalle cellule con funzione di catalizzatori, in grado cioè di favorire o accelerare determinate reazioni chimiche negli organismi viventi.