Tecniche di ibridazione fluorescente in situ?

Domanda di: Dott. Domiziano Fabbri  |  Ultimo aggiornamento: 5 agosto 2021
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L'ibridazione fluorescente in sito, in inglese Fluorescent in situ hybridization (FISH) è una tecnica citogenetica che può essere utilizzata per rilevare e localizzare la presenza o l'assenza di specifiche sequenze di DNA nei cromosomi.

A cosa serve l ibridazione in situ?

Tecnica di citologia molecolare, microscopica o submicroscopica, che consente di localizzare, riconoscere e identificare specifiche sequenze nucleotidiche presenti in determinate strutture, conservando pressoché inalterata la morfologia delle strutture e la relativa posizione delle sequenze.

Come si esegue il fish test?

L'esame viene effettuato mediante l'utilizzo di un sistema automatico di acquisizione ed elaborazione di immagini in microscopia a fluorescenza (Ikoniscope), che permette di ricercare con una estrema sensibilità le cellule uroteliali in evoluzione neoplastica, grazie all'elevatissimo numero di cellule analizzate.

Quale sonda radioattiva è utilizzata per visualizzare il DNA in un processo di ibridazione?

Sonde telomero-specifiche

L'ibridazione con una sonda telomerica specifica per uno dei bracci di un determinato cromosoma, marcata con un fluorocromo, permetterà di visualizzare segnali fluorescenti a livello dei telomeri di uno dei due bracci di una coppia di cromosomi omologhi.

A cosa serve una sonda molecolare?

In biologia molecolare, il probe (in italiano sonda) è un frammento di DNA di lunghezza variabile (di norma 100-1000 basi), che viene usato per rilevare in un DNA o RNA la presenza di determinate sequenze nucleotidiche (il DNA target) che sono complementari alla sequenza del probe.

FISH - Fluorescent In Situ Hybridization



Trovate 25 domande correlate

A cosa serve una libreria genomica?

Una libreria genomica è un insieme di segmenti di DNA provenienti dal genoma di un individuo di una data specie. Ogni segmento è trasportato di solito da un plasmide o da un fago. Le librerie genomiche sono utilizzate per clonare un particolare gene contenuto nel genoma della specie da cui è stata ottenuta la libreria.

A cosa serve il Southern Blot?

Il Southern blotting è una metodologia usata in biologia molecolare per rilevare la presenza di specifiche sequenze di DNA in una miscela complessa.

Come si Sequenzia il DNA?

Metodo Maxam-Gilbert

Il campione di DNA da sequenziare viene denaturato in presenza di DMSO e viene diviso in quattro aliquote uguali, ciascuna delle quali viene trattata con dei reagenti chimici che ne causano la metilazione o la rottura in corrispondenza di basi specifiche (G, A+G, C, C+T) (vedi tabella 1).

Come marcare DNA?

Il DNA che si vuole marcare viene dapprima denaturato tramite ebollizione e infine incubato a 37°C in una soluzione salina tamponata contenente: i quattro deossiribonucleotidi, di cui uno marcato con un isotopo radioattivo (generalmente fosforo, 32P); un enzima che promuove la sintesi del DNA (DNA polimerasi);

A cosa serve elettroforesi su gel?

L'elettroforesi del gel è una tecnica ampiamente usata nei laboratori di scienze biologiche per separare le macromolecole quali DNA, RNA e proteine. In questa tecnica, le molecole sono separate hanno basato sulla loro dimensione e carica elettrica.

A cosa serve l'esame Fish?

La FISH (ibridazione in situ fluorescente) è un test genetico che consente di rilevare, su specifica indicazione, alterazioni molto piccole della struttura dei cromosomi che non sono rilevate dall'analisi citogenetica tradizionale a causa dei limiti di lettura del microscopio.

Dove fare il fish test?

Test FISH sugli spermatozoi - S.I.S. Me. R - Centro di fecondazione assistita-sismer.it.

Che cosa sono i test genetici predittivi?

I test genetici predittivi sono esami genetici di laboratorio che analizzano la presenza di mutazioni in geni specifici, associate alla predisposizione di un soggetto a sviluppare determinate malattie, per valutare la suscettibilità di un soggetto a sviluppare resistenza o effetti collaterali a un farmaco.

Cosa studia la citogenetica?

L'analisi citogenetica (o mappa cromosomica o cariotipo) è lo studio dei cromosomi delle cellule. Nei cromosomi sono contenuti i geni costituiti da DNA, la molecola in cui sono presenti tutte le informazioni necessarie per la “costruzione” dell'individuo e il funzionamento dell'organismo.

A cosa serve la FISH tecnica in cucina?

Principio della tecnica FISH. ... Come tecnica citogenetica, la FISH può essere utilizzata su metafasi o nuclei in interfase provenienti da diverso materiale biologico, come ad esempio il sangue, biopsie o liquido amniotico.

Che cos'è la tecnica del DNA ricombinante?

È una porzione di Dna (la molecola elicoidale che contiene le informazioni genetiche) nella quale è stato introdotto un gene che appartiene a un organismo estraneo e che contiene le informazioni necessarie per stimolare (o anche inibire) la produzione di una particolare proteina.

Quali sono i componenti della molecola del DNA?

La descrizione di ciascuna molecola è scritta nel DNA secondo un codice basato su 4 elementi, adenina (A), timina (T), guanina (G) e citosina (C), detti basi azotate, disposti in sequenze di diversa lunghezza e organizzati in diverse combinazioni.

Come avviene la coniugazione batterica?

Se mettiamo un batterio HFR a contatto con un F- si forma il ponte di coniugazione, che invia un segnale di trasferimento genico per il quale una nucleasi taglia un'elica, il cromosoma inizia a replicarsi con un meccanismo a rolling circle, e la copia passa nella cellula F a partire dal punto di taglio.

Cosa dimostrano Hershey e Chase?

Nel 1952 i genetisti statunitensi Alfred Hershey e Martha Chase pubblicarono un lavoro che ebbe una risonanza immediata molto maggiore di quello di Avery. L'esperimento di Hershey e Chase, teso a stabilire se il materiale genetico fosse il DNA o le proteine, fu eseguito su un virus che infetta i batteri.

Quale tecnica consente di ricostruire la sequenza del DNA dopo che è stato frammentato?

Grazie alla tecnica del sequenziamento del DNA, che consente di determinare l'ordine delle basi azotate, siamo in grado di “leggere” il codice genetico. Dopo un sequenziamento, quello che si ottiene è un ordine di basi del tipo ATCGATCGAATTGGCCTTAA ecc.

Quanto costa sequenziare il genoma?

Il prezzo del Whole Genome Premium è di €899 (o $949) per la consegna veloce, e di €599 (o $649) per le tempistiche standard.

Quali sono le fasi della PCR?

Schema delle fasi di una PCR:
  • Denaturazione.
  • Annealing.
  • Allungamento.
  • Termine del ciclo.

A cosa serve il Northern Blot?

A differenza del southern blot, sviluppato per analizzare frammenti specifici di DNA, il northern blot permette di analizzare qualitativamente e quantitativamente la presenza di specifiche molecole di RNA nell'insieme degli RNA di una cellula o di un organismo.

Come funziona il Southern blotting?

Il Southern blotting prevede la separazione dei frammenti di DNA in base alle dimensioni tramite elettroforesi su gel, trasferendoli in una membrana, ibridandoli con una sonda specifica per sequenza etichettata e rilevando le bande etichettate.

A cosa servono le Mappe di restrizione?

mappa di restrizione. La mappa di restrizione di un frammento di DNA (o di più ampie regioni del genoma) mostra la localizzazione di ciascun sito di restrizione in relazione ai siti di restrizione adiacenti.

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