Cromatografia su colonna fase stazionaria?

Domanda di: Irene Parisi  |  Ultimo aggiornamento: 3 gennaio 2022
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La cromatografia su colonna è una particolare tecnica cromatografica che si basa sulla proprietà che hanno alcune sostanze, una volta sciolte in opportuni solventi, di fissarsi su materiali inerti (fase stazionaria) come ad esempio l'allumina, il talco o il carbonato di calcio.

Che cosa significa fase stazionaria?

Si parla di cromatografia di ripartizione quando la fase stazionaria è un liquido che impregna un solido granulare inerte, in cui le sostanze da separare si solubilizzano. ... Scontato ma importante, le fasi (stazionaria e mobile) devono essere immiscibili fra loro.

Che caratteristiche devono avere la fase mobile è la fase stazionaria nella cromatografia?

Nella cromatografia su strato sottile, la fase stazionaria è contenuta in un sottile strato di matrice solida, stratificata su una lastra di vetro, plastica o metallo. La fase mobile passa attraverso quella stazionaria per capillarità in senso verticale.

A cosa serve cromatografia su colonna?

La cromatografia su colonna è molto utile per la purificazione delle proteine e per la separazione di un gran numero di sostanze da esaminare singolarmente. A volte, le sostanze isolate con cromatografia su colonna perdono le proprietà che avevano all'interno della miscela.

Cosa si intende per fase mobile nella cromatografia?

In generale le tecniche cromatografiche si classificano sulla base delle fasi coinvolte. La fase mobile può essere un gas (GC), un liquido (LC) o un fluido supercritico (SFC). La fase stazionaria può essere un liquido o un solido per cui si potrà avere la GLC, LLC, SFLC, GSC, LSC a SFSC.

Cromatografia su colonna | Come funziona?



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Cosa si intende per cromatografia?

cromatografia Metodo fisico di separazione che permette di frazionare una miscela nei suoi componenti sfruttando la differente distribuzione fra due diverse fasi messe a contatto. ... gassosa, in cui la fase mobile è gassosa e la fase stazionaria può essere solida ( c. gas-solido) o liquida ( c. gas-liquido); c.

A cosa serve l eluente?

del part. pres. eluens -entis del lat. eluere "lavare"] Di liquido o gas usato per l'eluizione di sostanze adsorbite su un mezzo adsorbente.

A cosa serve un HPLC?

L'HPLC è uno strumento di analisi rapido e di facile impiego che consente di indagare un ampio range di sostanze. L'obiettivo principale di una analisi cromatografica è: ottenere una separazione completa di una miscela in tempi relativamente brevi.

Cosa si può separare con la cromatografia?

La cromatografia è una tecnica di laboratorio per la separazione delle componenti di una miscela. Essa si effettua dissolvendo la miscela in un fluido detto “eluente”. Il fluido, trasportando le componenti lungo un supporto, permette loro di stratificarsi in diverse posizioni del supporto.

Cos'è il tempo di ritenzione?

Tempo di ritenzione (tR): tempo necessario alla sostanza iniettata per essere eluita dall'inizio all'uscita della colonna. Tempo morto (tM): tempo di ritenzione di un composto che non è trattenuto e che passa attraverso la colonna alla stessa velocità con cui fluisce la fase mobile.

Quali fasi sono individuabili nella cromatografia?

Le fasi possono essere solide, liquide o gassosse in varie combinazioni in dipendenza del tipo di cromatografia, ad esempio fase mobile liquida e stazionaria solida o liquida, oppure fase stazionaria liquida e fase mobile gassosa.

Come scelgo il miglior eluente nella cromatografia?

Scelta dell'eluente. In TLC (cromatografia su strato sottile), cromatografia su colonna, HPLC, e altre tecniche cromatografiche, la scelta dell'eluente si basa sulla sua polarità: in base alla sua polarità l'eluente trascina con una "forza" diversa i componenti della miscela da separare.

Quanti tipi di cromatografia esistono?

Cromatografia liquida e gas cromatografia

Dalle combinazioni tra la fase mobile e la fase stazionaria si ottengono quattro tecniche cromatografiche: Cromatografia liquida: Liquido-solido; Liquido-liquido. Cromatografia gassosa: Gas-liquido; gas-solido.

A cosa serve l'equazione di Van Deemter?

L'equazione di van Deemter in cromatografia, chiamata in questo modo per Jan van Deemter, mette in relazione la varianza per unità di lunghezza di una colonna di separazione con la velocità della fase mobile lineare considerando le proprietà fisiche, cinetiche e termodinamiche di una separazione.

Come avviene la separazione di un miscuglio per cromatografia?

La cromatografia è una tecnica di separazione basata sulla diversa velocità di migrazione con cui più sostanze depositate su un supporto adatto (carta da filtro, gel di silice o di alluminio, ecc.), vengono trasportate da un fluido detto eluente e si stratificano in posizioni differenti sul supporto.

Dove si applica la cromatografia?

La cromatografia per affinità si applica anche alle proteine: in questo caso è basata sulle interazioni fra la proteina che ci interessa separare e un'altra proteina, per esempio un anticorpo specifico, o un acido nucleico immobilizzato sulla matrice inerte.

Come funziona la cromatografia liquida?

Si tratta di una tecnica cromatografica che permette di separare due o più composti presenti in un solvente sfruttando l'equilibrio di affinità tra una "fase stazionaria" posta all'interno della colonna cromatografica e una "fase mobile" che fluisce attraverso essa.

Su cosa si basa la cromatografia su carta?

La cromatografia su carta utilizza una forza capillare che sposta l'acqua (oppure un altro solvente) e il campione sulla striscia di carta. I composti più solubili del campione andranno più lontano, quelli meno solubili rimarranno sulla linea di partenza. Ciò provoca una loro separazione.

Cosa vuol dire eluizione?

eluizióne [Der. del lat. elutio -onis, da eluere "lavare"] Operazione che consiste nel riportare in soluzione una sostanza adsorbita da un mezzo adsorbente (caolino, ossido di alluminio, carbone attivo, resine scambiatrici, ecc.); tale operazione si pratica largamente, per es., nella cromatografia.

Perché non ha senso fare la cromatografia solo con i colori primari?

Perchè si formano le bande colorate.La maggior parte dei colori dei pennarelli è costituita dalla mescolanza di pigmenti colorati diversi (come visto nel mescolamento delle tempere). ... Alcuni colori, come il giallo, non si separano in bande perché sono appunto colori primari.

Quale fenomeno sfrutta per muoversi lungo la Carta?

Perché? Centrifugazione, che sfrutta la differenza di densità dei componenti.

Cosa serve l'imbuto separatore?

L'imbuto separatore in vetro è uno strumento utilizzato nei laboratori chimici per separare le componenti di una miscela attraverso l'uso di una fase solvente, solitamente composta da liquidi con due densità diverse, minori di quella dell'H2O.

Come migliorare la risoluzione in cromatografia?

Per migliorare la risoluzione si può agire o sulla ritenzione K dei due analiti (variando le due k si varieranno anche i due tempi di eluizione), oppure migliorando l'efficienza della nostra cromatografia, ottenendo due picchi più stretti che, anche senza cambiare il loro tempo di eluizione, non siano più sovrapposti.

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